Izoenzýmy alkalickej fosfatázy

Všeobecné informácie

Alkalická fosfatáza (ALP) je enzým, ktorý patrí do triedy hydroláz (ortofosfomonoesterfosfohydroláza). Ľudské sérum obsahuje premenlivú zmes izoenzýmov alkalickej fosfatázy (ALP) pochádzajúcich hlavne z pečene, čriev, obličiek a kostí, ku ktorým sa počas tehotenstva pridáva prechodná placentárna forma. Určité zhubné nádory môžu tiež produkovať izoenzým ALP 7 .

Aj keď je možné urobiť primerané hodnotenie týkajúce sa hepatálneho alebo nehepatálneho pôvodu rastu alkalickej fosfatázy, iba s použitím klinických údajov, existujú aj biochemické metódy, ktoré môžu rozlišovať medzi izoenzýmami 1; .

Najbežnejšou príčinou zvýšenia celkového ALP v sére je zvýšenie plazmatických hladín pečeňového izoenzýmu. Zvyšuje sa v krvi na začiatku ochorenia pečene pred zmenou ostatných funkčných testov. Akútna hepatitída, cirhóza, steatóza, liekmi indukované alebo iné toxické ochorenie pečene, obštrukcia toku žlče spôsobená karcinómom hlavy pankreasu, zúženie žlčových ciest, primárna biliárna cirhóza a metastatický karcinóm pečene spôsobujú zvýšenie plazmatickej koncentrácie pečeňového ALP 4. Je opísaných niekoľko pečeňových izoforiem 5 .

Alkalická fosfatáza kostného pôvodu - ostáza - je tetramérny glykoproteín, ktorý sa nachádza na povrchu osteoblastu a zasahuje do kalcifikácie kostnej matrice. Je známy ako citlivý a verný indikátor kostného metabolizmu. Má dlhý polčas, nie je ovplyvnený renálnym klírensom a nemá žiadne denné variácie 5 .

S vysokou úrovňou kostného izoenzýmu sa stretávame počas rastu kostí, počas procesu hojenia zlomenín, ako aj pri ochoreniach kostného systému charakterizovaných osteoblastickou hyperaktivitou a remodeláciou kostí, ako je Pagetova choroba, rachitída, osteomalácia, akromegália, osteosarkóm, Ewingov sarkóm, kostné metastázy (najmä spojené s karcinómom prostaty a prsníka) 4; 5; 6 .

Spolu s ďalšími markermi tvorby alebo resorpcie kostí sa môže ostáza použiť na sledovanie antiresorpčnej liečby u postmenopauzálnych žien s osteoporózou. .

Alkalická fosfatáza v čreve sa produkuje v enterocytoch, vo veľkom množstve sa uvoľňuje do krvi, najmä u ľudí s krvnou skupinou B (III) alebo O (I), ale rýchlo sa metabolizuje v pečeni. Za patologických stavov, ako sú: perforácia čreva, ulceratívne poruchy gastrointestinálneho traktu (žalúdok, tenké a hrubé črevo), akútny črevný infarkt a ochorenie pečene (cirhóza v dôsledku zníženého metabolizmu) sa zvyšuje sérová koncentrácia izoenzýmu v čreve 4 .

Placentárna forma ALP je v sére detegovateľná od 16. týždňa tehotenstva. Nádory (najmä urologické alebo gonádové) môžu občas produkovať alkalickú fosfatázu identickú alebo podobnú s placentárnou formou (Regan a Nagao izoenzýmy), ktorá spôsobí zvýšenie celkovej ALP v neprítomnosti metastáz 1; 5 .

Forma s vysokou molekulovou hmotnosťou je buď membránový multienzymový komplex alebo komplex pozostávajúci z pečeňového izoenzýmu a lipoproteínu X („ALP“ s „rýchlou pečeňou“). Táto forma sa vyskytuje pri cholestatickom alebo metastatickom ochorení pečene, aj keď sú plazmatické hodnoty ALP normálne.

Kasaharova forma ALP je heterodimér pozostávajúci z placentárnej a črevnej formy enzýmu, ktorý sa nachádza v hepatocelulárnych alebo obličkových karcinómoch. .

Odporúčania pre stanovenie izoenzýmov alkalickej fosfatázy

Diagnostika a monitorovanie liečby chorôb pečene, kostí, čriev a prištítnych teliesok;
Stanovenie zdroja zvýšenej aktivity alkalickej fosfatázy (ALP) v sére;
Diferenciálna diagnostika chorôb pečene a kostí 1; 4; 6 .

Výcvik pacientov - pôst (nalačno) 3 .

Odobratý exemplár - venózna krv 3 .

Zberová nádoba Vacutainer bez antikoagulancia s/bez separačného gélu 3 .

Po zbere potrebné spracovanie - oddeľte sérum odstredením 3 .

Objem vzorky - minimálne 0,5 ml ser 3 .

Príčiny odmietnutia dôkazov - intenzívne hemolyzovaný, lipemický alebo bakteriálne kontaminovaný exemplár 3 .

Stabilita vzorky - separované sérum je stabilné 7 dní pri izbovej teplote; 7 dní pri 4 - 8 ° C; 2 mesiace pri -20 ° C 3 .

Metóda - elektroforéza s následnou analýzou enzymatickej aktivity v samostatných frakciách; oddelia sa tieto frakcie: alkalická fosfatáza kostného pôvodu, alkalická fosfatáza pečeňového pôvodu 1, alkalická fosfatáza pečeňového pôvodu 2, alkalická fosfatáza črevného pôvodu (u 60% normálnych ľudí je črevný izoenzým nezistiteľný); placentárna alkalická fosfatáza (iba ak je to vhodné, pás zodpovedajúci tomuto izoenzýmu sa zvyčajne neobjaví) 3 .

Referenčné hodnoty - sú závislé od veku a pohlavia (budú uvedené v každom bulletine konečných výsledkov) 3 .

Interpretácia výsledkov

Zvýšené izoenzýmy pečene:

Pretože 2 izoformy pečene sú elektroforeticky separované, sú podmienky spojené s ich zvýšenými hodnotami nasledovné:

Zvýšené hodnoty izoenzýmu kostného pôvodu:

Zvýšená alkalická fosfatáza podobná placente alebo podobná placente („podobná placente“):

existujú dve formy placentárnych izoenzýmov: hlavná forma P1 (90%) a vedľajšia forma P2 (10%);
objavujú sa v 16. - 20. týždni normálneho tehotenstva, zvyšujúce sa na maximálnu hladinu (2-násobok normálu) na začiatku pôrodu 5;
zvýšenie tohto izoenzýmu sa vyskytuje u fajčiarov a pri niektorých malignitách, ako je semenníkový seminóm, vaječník, pankreas, karcinóm žalúdka a sarkómy. .

Zvýšené hodnoty črevného izoenzýmu: pri rôznych ulceróznych ochoreniach gastrointestinálneho traktu, závažnej malabsorpcii, črevnom infarkte 5 .